聚丙稀铣胺凝胶电泳简称(PAGE),是一种新型首选技术,很多人对它很陌生,接下来本文就给大家介绍一下聚丙烯酰胺凝胶电泳是如何工作的,主要用在哪里:
PAGE是一种技术,根据蛋白质等大分子的电泳迁移率(即分析物向相反电荷的电极移动的能力)来分离它们。在PAGE中,这由分子的电荷、大小(分子量)和形状决定,分析物通过聚丙烯酰胺凝胶中形成的孔隙移动。
PAGE的基本原理是通过电流使分析物通过聚丙烯酰胺凝胶的孔隙来分离它们。为了实现这一目的,通过添加过硫酸铵(APS)使丙烯酰胺-双丙烯酰胺混合物聚合(聚丙烯酰胺)。在四甲基乙二胺(TEMED)的催化下,该反应形成了一个类似于网状的结构,其中有孔隙,分析物可以通过它移动。
由于电泳过程中的电阻较小,较小的分子迁移得更快。蛋白质的结构和电荷也影响迁移率。十二烷基硫酸钠和聚丙烯酰胺消除了蛋白质结构和电荷的影响,蛋白质根据多肽链的长度进行分离。较小的孔径也会降低小蛋白质在凝胶中移动的速度,提高它们的分辨率,防止它们在电流作用下迅速跑到缓冲液中。
广泛用于法医学、遗传学、生物技术和分子生物学的技术。